为什么pcr跑完,机器没有数值,也没有溶解

温度不够高，时间不够长。根据查询仪器网信息得知，如果pcr反应条件不正确，可能会导致pcr反应失败，机器也没有数值，从而无法观察到溶解曲线。pcr又称为pcr基因扩增仪、pcr核酸扩增仪、聚合酶链反应核酸扩增仪，是利用pcr技术对特定DNA扩增的一种仪器设备，被广泛运用于医学、生物学实验室中。

鄞州区19385455467：定量PCR跑出来没有CT值,怎么回事
冻居天山：答：没有加燃料或者探针。或者探针设计有问题

鄞州区19385455467：为什么我做定量PCR无CT值(信号)出现?
冻居天山：答：博凌科为-为你解答：1.反应循环数不够。一般都要在35个循环以上，可根据实验情况增加循环（如至45cycles），但高于45个循环会增加过多的背景信号。2.检测荧光信号的步骤有误。一般SG法采用72℃延伸时采集，Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号。3.引物或探针降解。可通过PAGE电泳检测其完整性。

鄞州区19385455467：求助关于荧光定量PCR的CT值问题
冻居天山：答：没有CT值一般是产物荧光浓度在开始已经达到阈值或者跑完PCR后荧光未达到阈值。

鄞州区19385455467：PCR扩增后没有条带是怎么回事
冻居天山：答：有时还有必要用标准的温度计，检测一下扩增仪或水溶锅内的变性、退火和延伸温度，这也是PCR失败的原因之一。靶序列变异：如靶序列发生突变或缺失，影响引物与模板特异性结合，或因靶序列某 段缺失使引物与模板失去互补序列，其PCR扩增是不会成功的。

鄞州区19385455467：PCR跑不出条带
冻居天山：答：回答：PCR没有产物的原因可能有: 1)引物参数及引物和模板的匹配; 2)模板的质量,可以用其他引物作为阳性对照; 3)反应条件; 4)酶失活; 5)电泳条件; 根据你的说法,引物和PCR条件应该是没有问题的,那么没有条带,是完全是黑的还是很弥散拖着的呢?你应该考虑一下酶是否失活的问题,或者是胶的浓度合不...

鄞州区19385455467：我做的pcr跑完胶完全没条带怎么回事?就好像没加DNA似的
冻居天山：答：非特异性扩增产物。应该优化PCR反应，比如提高退火温度（首选）、减少酶量（首选）、降低镁离子浓度、降低模板浓度、降低引物浓度等等。如果不行，还可以重新设计引物，增强引物的特异性。

鄞州区19385455467：pcr产物琼脂糖凝胶电泳结果示什么都没有了,连溴酚蓝也没了
冻居天山：答：有几种可能 首先，胶的方向没放对，有可能从侧面或者后面跑出去了。你再跑电泳时要确定梳子孔的方向要与电流方向垂直。其次，电泳时间过长。可以缩短电泳时间，或者做浓度更高的胶，比如1.5%或者2%的胶。第三，还可能是你的琼脂糖有问题。

鄞州区19385455467：【求助】为什么经常PCR会出不来呢,帮忙啊
冻居天山：答：如果是的话问题应该出现在操作上。PCR反应体系中的个物质用量都很少，你加完试剂后有没有短暂离心或是振荡过？有时候试剂都残留 在管壁上。还有，你使用的EP管是薄壁的还是厚壁的，这也有影响的。也有可能是加样的枪不准，你可以留意一下wuminwenke wrote:你的指导老师也是用的同样的试剂和反应体系吗...

鄞州区19385455467：实验做的RT-PCR,不知道问什么总是出不来结果,曲线杂乱无章。是什么...
冻居天山：答：你扩增曲线达到的上限值是多少？比较一下同一设备别人做的实验结果。如果数值低太多，应该是反应体系中的Taq有问题，很可能是你添加或混匀的操作不对。

鄞州区19385455467：做PCR的时候为什么同样的东西同样的操作,结果就是会不一样呢,有时候...
冻居天山：答：首先，确认你的引物和模版，buffer和Taq酶没有拿错别的 其次，你的引物和模版是如何保存的？会不会因为保存不当而降解了。具体方法就是拿别人的模版或者已知有效的模版再做一次，如果是质粒，可以直接抛个电泳，如果是cDNA之类的，可以用GAPDH之类的做一下看看 第三，用别的仪器做一个对照，看看仪器的...