跑PCR已加好的体系先放冰箱里过1.5小时后再跑行不行？
来源：网友推荐 更新：2024-05-18
如果你的PCR体系里面,所有东西都已经加进去了,就很难保存了.因为酶会开始发挥功能,导致引物对模板的非特异的结合,引起非特异扩增.这样等到再去做实验的时候,有了非特异的模板干扰,最后得到的结果就会很差.
所以在加PCR反应体系的时候,都建议在冰上操作的.实在不行了,扔在4C冰箱没有问题.如果PCR过程中,突然断电了,一定要把反应管从PCR仪里面捞出来,放到4C冰箱去.冰箱多少有点保温的效果,比放在PCR仪中强.如果长时间停电,那就再做一管好了.
4℃放置，放上1天是可以的。配好的体系就不能放在0℃以下了，冻融对taq酶活性影响很大。
只能放入4度，-20度会把酶弄失活的，你也看到了酶的保存一般里面都有甘油，就是因为结冰后酶会坏放1.5小说肯定没事。
我有时都过夜呢，pcr出来结果一样。
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看你模板是什么了，如果是活细菌之类的，必须现配现跑！
如果是提纯过的DNA为模板，或者根本没加模板，那放4度几天都没问题。
我经常用PCR作为检测手段，但是检测的工作可能持续几天都会要用，
所以一次配好一整管PCR体系，包括酶，然后几天之内现用现加模版（活菌）
如果你不放心，跑PCR之前再重新补加一次酶好了。
你可以很严肃地告诉你师兄：热聚合酶在室温下没有反应活性！
更别提现在稍微好一点的热启动热聚合酶都配有抗体，在加热到抗体失活之前都处于抗体-抗原凝聚状态，更不可能有活性。
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过夜后再跑
旗呼蜂蜜：答：可以的，放在4℃冰箱，效果怎么样，你不妨试一下。我们实验室一懒人更离谱，懒得制胶，上次跑过的胶，他凝胶成像看过后，接着跑，等把里面的DNA跑出去以后，这块胶接着用。但是不提倡这样，毕竟制一块胶也不是什么很复杂的事情
旗呼蜂蜜：答：有了非特异的模板干扰,最后得到的结果就会很差.所以在加PCR反应体系的时候,都建议在冰上操作的.实在不行了,扔在4C冰箱没有问题.如果PCR过程中,突然断电了,一定要把反应管从PCR仪里面捞出来,放到4C冰箱去.冰箱多少有点保温的效果,比放在PCR仪中强.如果长时间停电,那就再做一管好了.
旗呼蜂蜜：答：如果放在PCR仪里，就把PCR反应最后一步设为4度。此外，还可以放在4度冰箱。
旗呼蜂蜜：答：一般来说不会，但是菌液模板最好重新配吧，或者你试着提取质粒。PCR体系的东西，最好都是比较新鲜的。
旗呼蜂蜜：答：1、PCR样本可分2种，DNA样本和RNA样本。2、DNA样本：已经提取好的DNA样本，负80度保存，干冰运输；血液样本，需全血，加入抗凝剂，抗凝管4度保存；组织样本，需冻存管或干净灭菌的离心管装，负80度保存，干冰运输；细胞样本，用胰酶消化后的细胞沉淀，负20度或负80度保存。3、RNA样本：提取好的RNA...
旗呼蜂蜜：答：加样后能放一天。qpcr加完样可以放4°冰箱，但是大概只能放一天左右。PCR的反应程序不需要像常规的PCR那样，要变性、退火、延伸3步。
旗呼蜂蜜：答：才半个多月，不可能会失活的，除非你们实验室停电了……PCR引物要在-20℃或-70℃保存，要避免反复冻融造成DNA降解 参考资料：http://www.dgmaigen.com/news_ex.asp?id=60
旗呼蜂蜜：答：PCR产品，跑琼脂糖胶一般跑30-50分钟已经足够，当然如果你的时间充裕的跑上3-4个小时也是没问题的，前提是样品不要跑出胶外。
旗呼蜂蜜：答：不会。过夜4度连接是常用的方法。
旗呼蜂蜜：答：这种情况可以。PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内，最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚至消失。PCR反应的关键环节有：模板核酸的制备，引物的质量与特异性，引物质量、引物的浓度、两条引物的浓度是否对称，酶的质量和PCR循环条件。
