求助跑qpcr
来源:网友推荐 更新:2024-05-04
万邵莆田:答:PCR产品,跑琼脂糖胶一般跑30-50分钟已经足够,当然如果你的时间充裕的跑上3-4个小时也是没问题的,前提是样品不要跑出胶外。4度冰箱里放个一两天应该没有问题。你可以采用每次反应完后软件自己选定的阈值。你也可以手动...
万邵莆田:答:只能放入4度,-20度会把酶弄失活的,你也看到了酶的保存一般里面都有甘油,就是因为结冰后酶会坏 放1.5小说肯定没事。我有时都过夜呢,pcr出来结果一样。
万邵莆田:答:如果在短时间(一天)之内要跑电泳的话建议4度保存,如果要几天或是更长时间的话建议-20度保存,当然如果一定要放4度也没关系,我以前有一个样品在4度放了2个月,也没有明显变化。
万邵莆田:答:所以,我认为,要想出一个靠谱的实验,也为了避免实验结果显示的乱七八糟,还是做一下比较好。还有一种电泳则是cDNA电泳,那是半定量必须要做的一步,但对于QPCR来说,做了无非是锦上添花,不做也无可厚非。甚至有时候...
万邵莆田:答:十年的变化很大。10年前(我大一)到实验室时,常规的pcr都不舍得加多0.2ul的rTaq,更不提跑一个qPCR就烧掉大几百的荧光定量。伴随着测序成本的降低和科研经费支持的增加(主要是说我们小打小闹的单位),qPCR实验天天都...
万邵莆田:答:温度不够高,时间不够长。根据查询仪器网信息得知,如果pcr反应条件不正确,可能会导致pcr反应失败,机器也没有数值,从而无法观察到溶解曲线。pcr又称为pcr基因扩增仪、pcr核酸扩增仪、聚合酶链反应核酸扩增仪,是利用pcr技术...
万邵莆田:答:可以,但是需要重新配置。要想重跑,必须重新配置反应体系,不可以不配置的情况下重新跑,跑完之后,酶已经失去活性,再跑一遍已经没有意义。
万邵莆田:答:4、完成步骤三后会弹出你的QPCR曲线结果图。开始对结果图进行分析。首先点击Quantification那栏,看看QPCR的特征曲线跑得怎么样。用鼠标随意点击上面的一条绿色曲线,就出现相对应的哪个孔的Cq值。5、开始对曲线进行分析。这里...
万邵莆田:答:QPCR产物为什么需要跑胶:1、检测PCR的成功与否 2、可以作为你优化PCR条件的依据 3、可以大概确定你PCR产物的量
万邵莆田:答:4、完成步骤三后会弹出你的QPCR曲线结果图。开始对结果图进行分析。首先点击Quantification那栏,看看QPCR的特征曲线跑得怎么样。用鼠标随意点击上面的一条绿色曲线,就出现相对应的哪个孔的Cq值。5 5、开始对曲线进行分析。这...